基于變性泡介導(dǎo)的鏈交換擴(kuò)增技術(shù)（Strand Exchange Amplification, SEA）是我公司自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新一代等溫核酸檢測(cè)技術(shù)，具有簡(jiǎn)單、快捷、經(jīng)濟(jì)、高特異性、高靈敏度，高擴(kuò)展性等特點(diǎn)，在醫(yī)療健康、食品安全、檢驗(yàn)檢疫、環(huán)境監(jiān)測(cè)、動(dòng)物疫病等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。
單核增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）是一種常見(jiàn)的土壤細(xì)菌，在土壤中它是一種腐生菌，以死亡的和正在腐爛的有機(jī)物為食。它也是某些食物（主要是鮮奶產(chǎn)品）中的一種污染物，能引起嚴(yán)重食物中毒。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病，感染后主要表現(xiàn)為敗血癥、腦膜炎和單核細(xì)胞增多，嚴(yán)重威脅人類(lèi)的健康，因此單增李斯特菌在食品中的檢測(cè)尤為重要。
應(yīng)用SEA技術(shù)以單增李斯特菌為研究對(duì)象，本團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了檢測(cè)單增的核酸快速檢測(cè)試劑盒，并將研究結(jié)果發(fā)表在Anal,Biochem.2018, 545: 38-42 ，結(jié)果表明具有產(chǎn)品較高的特異性和靈敏度，重復(fù)性好，可以商品化使用。
1. 特異性和抗干擾能力
A: SEA方法的特異性。1-6分別表示的是：以單核細(xì)胞增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌和大腸桿菌O157：H7的增菌液為基礎(chǔ)，稀釋1000倍后為擴(kuò)增靶標(biāo)；7表示NTC。
B: SEA方法的抗干擾能力。1ˊ 表示靶標(biāo)為稀釋1000倍的單核細(xì)胞增生李斯特菌的增菌液；2ˊ 表示靶標(biāo)為增菌液的混合物，即單核細(xì)胞增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌和大腸桿菌O157：H7的增菌液稀釋1000倍后，按1:1:1:1:1:1的比例混合。3ˊ 表示NTC。
2. 檢測(cè)限和重復(fù)性
A: 不同濃度的單核細(xì)胞增生李斯特菌基因組DNA的實(shí)時(shí)熒光曲線(xiàn)。1-5分別表示為1.0 ×10^(-10) M至1.0 ×^(-14 ) M，稀釋10倍，6表示NTC。
B: Tt值與基因組DNA靶標(biāo)量（CLM）的負(fù)對(duì)數(shù)值之間的關(guān)系。誤差棒顯示三次測(cè)定的平均標(biāo)準(zhǔn)偏差。
C: 使用PAGE電泳觀察相應(yīng)的SEA反應(yīng)產(chǎn)物。
除此之外，我公司在食品安全領(lǐng)域其他致病菌，如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157：H7、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌等均有系列核酸檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品在多省市食藥監(jiān)局盲樣抽檢中表現(xiàn)優(yōu)異，已和國(guó)內(nèi)知名食品企業(yè)簽訂戰(zhàn)略合作協(xié)議，獲得良好的客戶(hù)反應(yīng)度，歡迎廣大客戶(hù)及經(jīng)銷(xiāo)商采購(gòu)。
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